Le petit mil (Pennisetum glaucum (L.) R. Br.) est l’une des anciennes céréales, cultivées au Bénin et qui joue un rôle important dans la sécurité alimentaire dans les zones rurales. Malgré ses atouts et potentialités, il est considéré comme une culture secondaire et sa production s’affaiblit de jour en jour. Pour une meilleure valorisation de cette importante ressource génétique au Bénin, une enquête ethnobotanique basée sur une approche participative a été conduite dans 32 villages choisis dans quatre zones agro-écologiques de production (Zone extrême Nord-Bénin, Zone cotonnière du Nord-Bénin, Zone vivrière du Sud-Borgou et Zone Ouest-Atacora) afin de documenter les connaissances endogènes liées à sa production, les contraintes de production, les pratiques culturales, la taxonomie locale, la distribution géographique des cultivars et les diverses utilisations faites de ses cultivars. Les outils d’analyses statistiques comme l’Analyse de variance (ANOVA) et l’Analyse factorielle des correspondances ont été utilisée pour décrire la variation du nombre de cultivar par zone agroécologique et des utilisations spécifiques par groupe ethnique et zone agroécologique respectivement. L’étude a révélé l’existence d’une très faible diversité locale des cultivars (1 à 3 par village par ménage), la diversité la plus élevée a été obtenue dans la zone extrême NordBénin (2,20 ± 0,20) et la plus faible dans zone vivrière du Sud-Borgou (1,16 ± 0,16) et la zone Ouest-Atacora (1,00 ± 0,09). Le cycle végétatif (84,38 %) et la couleur des grains (71,88 %) sont les principaux critères de nomination et de différentiation des cultivars. Les pratiques culturales dans ces zones sont similaires et les grains de mil sont souvent conservés dans le grenier (70,54 %). Une nouvelle forme de conservation dans les gourdes a été observée chez les Tchila dans la zone Ouest-Atacora. Au total, 7 contraintes ont été recensées et hiérarchisées dont les plus importantes sont l’irritation de la peau démangeaison (score global = 7,17) et le sarclage (score global= 6,27). Le mil est essentiellement cultivé à des fins alimentaires (59,09 %), culturelles (11,48 %) et commerciales (51,22 %). Ces résultats sont utiles pour guider les études de diversité génétique du petit mil au Bénin et définir des stratégies appropriées pour sa conservation.